UN NUEVO MARCADOR PARA PROGENITORES HEMATOPOYÉTICOS EN SANGRE DE CORDÓN UMBILICAL (SCU), AC133.
EM Villarón, ME Fernández*, A Brufau, JL Arroyo, A Izarra, C Pata, A Orfao, MC del Cañizo y JF San Miguel.
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Becaria de Schering-Plough.Servicio de Hematología. Hospital Universitario. Salamanca.
El marcador AC133 parece definir una población de células progenitoras inmaduras, así como dichas células comprometidas a línea granulomonocítica.
MATERIAL Y MÉTODOS: Se procesaron un total de 17 muestras de SCU. Tras separación por Ficoll se procedió a la selección positiva de células CD34+ y AC133+ por métodos inmunomagnéticos (MiniMACS). Se realizaron estudios de inmunofenotipo en los diversos pasos del estudio (basal, MNC,fracciones CD34+, CD34-, AC133+ y AC133-) utilizando los siguientes marcadores: CD34, AC133, CD38 y CD117. Se estudió el funcionalismo celular por medio de ensayos clonogénicos (CFU-GM, BFU-E, CFU-Mix) y ensayos Delta para el análisis de progenitores determinados e inmaduros respectivamente.
RESULTADOS: La proporción de células CD34+ y AC133+ en las diferentes muestras fue la siguiente: en la sangre sin procesar 0,15 (0,04-0,37) y 0,12 (0,03-0,30) respectivamente, p=0,35, con un 71,78% que comparten ambos antígenos; en la fracción mononucleada: 0,38 (0,07-1,55) y 0,26 (0,12-1,22), p=0,03, con un 71,29% de células CD34+AC133+. En la selección por CD34, un 59,83% de las células fueron CD34+AC133+ y en la selección por AC133 un 90,28% compartían ambos antígenos. Con el fin de conocer la intensidad de expresión de CD38 y CD117 en dichas subpoblaciones se analizaron los canales medios de expresión de dichos antígenos (Tabla).
CM CD38: LG CD34+ |
CM CD38: LG AC133+ |
CM CD117: LG CD34+ |
CM CD117: LG AC133+ |
|
Basal |
18,81 |
42,49 |
248,23 |
229,03 |
MNC |
21,53 |
18,59 |
185,32 |
184,04 |
Selección CD34+ |
26,52 |
- |
76,2 |
- |
Selección AC133+ |
- |
14,28 |
- |
44,66 |
CM: Canal medio de expresión. LG: Live-Gate. MNC: Células Mononucleadas.
Resultados expresados en mediana.
El crecimiento "in vitro" fue similar en ambas subpoblaciones ; CFU-GM: 580 frente 660 para CD34+ y AC133+ respectivamente, con p=0,07; BFU-E: 740 frente a 1000, p=0,78; Ensayo Delta: 1057 frente a 1019, p=0,27.
En conclusión, las poblaciones de SCU analizadas según la expresión de CD34 y AC133 son similares tanto desde punto de vista fenotípico como funcional.