EFECTO PROFIBRINOLITICO DE UNA HEPARINA DE BAJO PESO MOLECULAR DE SEGUNDA GENERACIÓN, BEMIPARINA, EN CULTIVOS DE CÉLULAS ENDOTELIALES HUMANAS (HUVECs).
Pérez A1, Carrasco P2, Franco Y1, Cibrian E1, García N1, Montes R1, Rocha E1,3.
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Unidad de Hemostasia y Trombosis, Universidad de Navarra, 2Laboratorios Rovi, y 3Servicio de Hematología, Clínica Universitaria, Pamplona.
INTRODUCCIÓN
Estudios previos en nuestro laboratorio demuestran que la heparina no fraccionada (HNF) reduce la expresión endotelial de PAI-1, por lo que su acción terapéutica no sólo sería antitrombótica, sino que además mejoraría el potencial fibrinolítico. Por otra parte, es creciente el uso de preparados de heparina de bajo peso molecular (HBPM), que está sustituyendo a la HNF como fármaco antitrombótico, no habiéndose caracterizado aún su posible potencial profibrinolítico.
OBJETIVO
Estudiar el efecto de un preparado de HBPM de segunda generación, Bemiparina (RO-11, Laboratorios Farmaceúticos Rovi S.A.), en comparación con HNF, sobre la síntesis y liberación endotelial de t-PA y PAI-1, implicadas en el mecanismo fibrinolítico. También se pretende ver el efecto de este fármaco en dos proteínas implicadas en la vía extrínseca de la coagulación, factor tisular (FT) y de su inhibidor, TFPI.
MATERIAL Y METODOS
Se estimularon HUVECs con Bemiparina o HNF (1 y 10 U/ml). Cada experimento se realizó por triplicado y los resultados se compararon con tres cultivos no estimulados. Se recogieron sobrenadantes y células a las 0, 2, 6 y 24 horas. Se determinó la secreción proteica de t-PA, FT, TFPI y PAI-1 por ELISA, así como la actividad PAI por sustratos cromogénicos. La expresión del gen del PAI-1 se estudió por RT-PCR tras la obtención de mRNA a partir de las células endoteliales.
RESULTADOS
Se observó un descenso en la expresión del mRNA del PAI-1 con 1 U/ml de Bemiparina. Se produjo un incremento en los niveles antigénicos y en la actividad PAI, tanto con HNF como con Bemiparina. Ésta indujo un aumento en los niveles de t-PA, aunque menos pronunciado que el observado con HNF. Por otra parte, ni la Bemiparina ni HNF causaron un aumento en los niveles de TFPI. Sin embargo, HNF indujo un incremento mayor que la Bemiparina en la secreción de FT.
CONCLUSIÓN
La disminución en la expresión de PAI-1 y el aumento del t-PA antigénico observados con una dosis terapéutica de Bemiparina (1 U/ml), sugieren que ésta podría tener un potencial profibrinolítico. El hecho de que HNF induzca mayor secreción de FT que la Bemiparina podría constituir una ventaja adicional de esta HBPM respecto a HNF.