CINÉTICA DE LA RECOGIDA DE PROGENITORES HEMATOPOYÉTICOS DE SANGRE PERIFÉRICA (PHSP) CD34+ DURANTE EL PROCEDIMIENTO DE AFÉRESIS .
A Merino, M Díaz-Ricart, B Fusté, M Lozano, C Sanz, R Mazzara y A Ordinas.
Servicio de Hemoterapia - Hemostasia . Hospital Clinic. IDIBAPS. Universidad de Barcelona.
Un mejor conocimiento de la movilización de progenitores hemopoyéticos (PH) a sangre periférica (SP) durante el procedimiento de aféresis puede ser útil para optimizar su recolección. El objetivo del presente trabajo es el estudio de las subpoblaciones de PHSP CD34+ recogidos en diferentes etapas del procedimiento de aféresis y la evaluación de su capacidad de expansión.
Material y métodos: Se analizaron muestras de SP y aféresis (inicio, mitad y final del procedimiento) en 9 casos (8 donantes y 1 paciente con neoplasia de ovario) movilizados con G-CSF. Las aféresis se realizaron mediante un separador celular Fenwal CS 3000 Plus, procesándose en total 8L (N=3), 12L (N=4) 14L (N=1) o 20L (N=1). La cuantificación de PHSP CD34+ se efectuó mediante citometría de flujo con los AcMo CD34-PE (HPCA-2) y CD45-FITC (BD). Para ello se realizaron regiones secuenciales (protocolo ISHAGE) y se adquirieron 75000 eventos (FACscan). El estudio de las subpoblaciones de PH CD34+ se realizó con los Ac Mo CD34 PerCP, CD33 PE, HLA-DR FITC y AC133 PE. Para valorar la capacidad de expansión de los PHSP recogidos en la 1ª y 2ª mitad del procedimiento de aféresis se realizó en 3 casos una selección inmunomagnética de células CD34+ (MiniMacs) y un cultivo sobre línea estromal (M210B4) sin contacto durante 4 semanas.
Resultados: Los valores medios de los PHSP CD34+ iniciales fueron de 109± 90/m L (26,7-274), en la mitad del procedimiento de aféresis de 58± 41/m L (23-142) y al finalizar el mismo de 73± 40m L (23-139). En promedio se obtuvieron 429 x 106 (± 332) células CD34+ mediante aféresis (extremos: 156-1276 x 106). Se recogió una mayor cantidad de PHSP en la 2ª mitad de la aféresis respecto a la 1ª (en promedio x 1,2) en todos los casos, excepto en el que presentó (caso 8) un menor recuento inicial de PHSP (26,7/m L). En 7/7 casos se observó una mayor cantidad de PH CD34+CD33- en la 2ª mitad del procedimiento de aféresis respecto de la 1ª (en promedio x 1,2). Junto a ello, en 5/6 casos se obtuvo una mayor cantidad de PH CD34+HLA-DR- (en promedio x 1,4) y en 2/3 casos de CD34+ AC133+ (en promedio x 1,2) en la 2ª mitad de la aféresis en relación con la 1ª. Sólo el caso 8 presentó menor cantidad de PH CD34+HLA-DR- (x 0,78) y de CD34+AC133+ (x 0,58) en la 2ª parte de la aféresis. En 3/3 casos se observó en promedio una mayor expansión del número inicial de células correspondientes a la 2ª mitad de la aféresis (x 13) respecto a la 1ª ( x 5). Nuestros resultados sugieren que el producto obtenido mediante procedimientos de aféresis de largo volumen contiene no sólo un mayor número de células, sino también de PH más inmaduros.