ENUMERACION DE CELULAS CD34+ UTILIZANDO EL KIT ProCOUNT.

R Parra1, X Gómez2, M Torrabadella1, Ll Massuet1

1Centre de Transfusió i Banc de Teixits. Barcelona. 2Servei de Citometria. Universitat de Lleida.

  

La determinación de células CD34 es un análisis de eventos infrecuentes cuyo resultado varia según la manipulación de la muestra, la estrategia de adquisición en el citómetro y el contador celular, lo que da lugar a una variabilidad intra e interlaboratorio que contribuye a las diferencias que se observan entre diferentes centros. La introducción de kits diagnósticos puede contribuir a mejorar esta situación ya que proporciona el mismo protocolo para todos los usuarios.

Material y métodos: En el presente estudio hemos comparado los resultados obtenidos en 50 muestras (26 aféresis, 9 sangre periférica, 15 sangre de cordón) utilizando el protocolo ISHAGE junto al recuento de leucocitos obtenidos del contador celular CellDyn 1700 (doble plataforma) con el resultado obtenido con ProCOUNT 2.0 (plataforma única). En el protocolo ISHAGE las muestras de aféresis se procesaron sin utilizar lisado de hematies mientras que para las muestras de sangre periférica y sangre de cordón se utilizó lisis con cloruro amónico (Ortho) y lavado con PBS. Para el kit ProCOUNT todas las muestras se procesaron utilizando lisis de hematies sin lavado posterior.

Resultados: expresados en forma de media. p:prueba de Wilcoxon

CD34 %

CD34/uL

muestra

ISHAGE

ProCOUNT

p

ISHAGE

ProCOUNT

p

Aféresis

0,87

0,79

0,001

1064,8

1003

0,148

SP

0,26

0,24

0,624

18,6

20,4

0,767

SC

0,35

0,28

0,004

271,5

209

0,005

Aunque existe cierta tendencia a que ProCOUNT proporcione valores inferiores al método ISHAGE, no hemos encontrado diferencias significativas para los valores CD34/uL entre ambos sistemas para las muestras de aféresis. Asímismo, el kit ProCOUNT proporciona resultados similares de CD34% y CD34/uL en muestras de sangre periférica. Sin embargo, en las muestras de sangre de cordón, con ProCOUNT se obtienen valores de CD34% y CD34/uL significativamente inferiores que con el método ISHAGE.

Conclusión: ProCOUNT cuantifica la población CD34+ sin diferencia significativa que el método de doble plataforma en las muestras de aféresis y sangre periférica, facilitando una mejor estandarización de los resultados.